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              Super-Bradford蛋白定量試劑盒說明書
              發布時間:2020-10-15 點擊量:1179

                

                   Super-Bradford蛋白定量試劑盒說明書

               

              Super-BradfordProteinAssayKit                                                       

              Super-Bradford 蛋白定量試劑盒說明書

               

              

              Cat.No. K0013                         

               

              保存:2-8℃

               

              組分說明

              

               

              Catalogno.                                 K0013

              KitSize                                800 次/微孔,100 次/試管

              BradfordProteinAssayReagent               200ml

              BSA 標準液(2mg/ml)                          2ml

               

              

               

              產品簡介

               

                  Bradford 法是簡單和快速的比色蛋白定量方法。這一方法基于考馬斯亮藍 G-250 與蛋白質結合后,產生藍色化合物,反應迅速而穩定。反應化合物在 465-595nm 處有大的光吸收值,化合物顏色的深淺與蛋白濃度的高低成正比關系,因此可通過檢測 595nm 的光吸收值的大小來計算蛋白的含量。本產品將傳統的 Bradford 方法進行了改良,大限度的加大蛋白定量的線性范圍,變異性小于普通考馬斯亮藍染色法,靈敏度范圍為 100-1,500 μg/ml。使用本產品反應迅速,顏色產物 1 小時內保持穩定。本試劑盒適用于多種緩沖液系統,不受金屬離子、還原劑和螯合劑的干擾。

               

              注意事項 

               

               1.  如待測樣品中含較多的干擾物質(具體見附表 1),可采用 BCA 蛋白定量試劑盒(K0014)或其他蛋白定量產品。

               

               2.  BSA 標準品的稀釋液需與待測樣品的稀釋液一致(可用 1×PBS 或 0.9%生理鹽水進行稀釋)。

               

               3.  本試劑盒不適合含有去污劑的蛋白定量,所測蛋白分子量必須大于 3kD。

               

               4.  操作中請佩戴手套。

               

               5.  本產品僅限科研使用。

               

              

              操作步驟(以大腸桿菌表達系統為例)

               

               1.  稀釋 BSA 標準品:用與待測蛋白樣品相一致的稀釋液按下表稀釋 BSA 標準品。

               

               

                                                              

              管號    稀釋液用量(μl)   BSA標準品用量(μl)    BSA標準品終濃度(μg/ml)

                                                               

               

              A                 0                 100                2,000

              B                50                 150                1,500

               

              C                200                200                1,000

               

              D                200         200(從C管中取)          500

              E                200         200(從D管中取)          250

               

              F                200         200(從E管中取)           125

              G                200                 0                 0(空白)

               

               

               2.  試管檢測(檢測范圍:100-1500 μg/ml)

               

                  1)按上表稀釋標準品,將 30 μl 稀釋好的 BSA 標準品分別加到作好標記的試管中。 

                  2)取干凈的試管,分別加入 30 μl 待測蛋白樣品(原液或稀釋液),并作好標記,推薦每個測定做 2-3 個平行反應。

               

                  3)向步驟 1)和步驟 2)的試管中各加入 1.5mlBradfordProteinAssayReagent,充分混勻,室溫放置 10 分鐘。

               

                  4)用分光光度計測定 595nm 處的吸光值。

               

                  5)繪制標準曲線,計算樣品中的蛋白濃度。

               

                      注意:數據處理時需要去除明顯錯誤的值。未知樣品濃度可以從標準曲線中查得, 實際濃度需要乘以樣品的稀釋倍數。如果是計算機繪制得曲線,可以從計算機給出的線性方程式計算出未知樣品的濃度。

               

                  6)如果所得到的蛋白濃度不在檢測范圍內,請重新稀釋樣品后再次測定。

               

               3.  微孔檢測(檢測范圍:100-1500 μg/ml)

               

                  1)將按表 1 稀釋好的 A-GBSA 標準品和待測蛋白樣品(原液或稀釋液)各 5 μl 分別加到作好標記的 96 孔板微孔中。 

               

                  2)每孔加入 250 μlBradfordProteinAssayReagent,充分混勻,蓋上 96 孔板蓋,室溫放置 10 分鐘。

               

                  4)用酶標儀測定 595nm 處的吸光值。

               

                  5)繪制標準曲線,計算樣品中的蛋白濃度。

               

                      注意:數據處理時需要去除明顯錯誤的值。未知樣品濃度可以從標準曲線中查得, 實際濃度需要乘以樣品的稀釋倍數。如果是計算機繪制得曲線,可以從計算機給出的線性方程式計算出未知樣品的濃度。

               

                  6)如果所得到的蛋白濃度不在檢測范圍內,請重新稀釋樣品后再次測定。

               

                

               

              實驗代做服務:

              ELISA試劑盒免費代檢測

              CCK8檢測

              HE染色

              蛋白相互作用分析

              Western Blot

              免疫組化IHC染色

              熒光定量PCR

              動物模型服務

              流式細胞檢測

              免疫熒光染色

              激光共聚焦

              DNA甲基化實驗

              石蠟/冰凍切片

              透射電鏡服務

              掃描電鏡實驗

              蛋白雙向(2-D)

              動物實驗

              免疫共沉淀

              原位雜交(FIsh)

              蛋白質純化

              分子克隆和質粒載體構建服務

              組蛋白甲基化磷酸化乙酰化

               

              蛋白雙向2D-WB

               

              藥理毒理動物實驗

               

              番紅O固綠染色

              明膠酶譜MMP

              酶活性檢測

              動物造模/模型實驗服務

              電話咨詢
              • 服務熱線:
              • 400-665-0203

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